Padronização da quantificação de violaceína produzida por Chromobacterium violaceum através de métodos colorimétricos
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Data
2022-03-09Primeiro coorientador
Voos, Monica
Primeiro membro da banca
Bairros, André Valle de
Segundo membro da banca
Souza, Márcia Ebling de
Metadata
Mostrar registro completoResumo
A regulação Quorum Sensing (QS) está intimamente relacionada com o mecanismo de formação de biofilme em diversos microrganismos. Na espécie Chromobacterium violaceum (CV) é possível verificar esta regulação através da produção da violaceína, um pigmento de coloração violeta. O bloqueio da produção dessa proteína, tem sido utilizado como indicador da inibição do QS. Para demonstrar a inibição do QS não há necessidade de inviabilizar a bactéria, ou seja, não precisa haver a morte bacteriana. Entretanto, a quantificação de violaceína necessita de instrumentação laboratorial robusta e trabalhosa, além de exigir infraestrutura onerosa e recursos humanos especializados. Neste contexto, objetivamos avaliar a produção e inibição de violaceína, onde as leituras foram realizadas através do aplicativo Android Photometrix UVC acoplado a uma câmera endoscópica USB. Para avaliar o bloqueio da produção de violaceína, foi utilizado o ácido salicílico, um produto de origem natural, amplamente utilizado como analgésico, anti-inflamatório e antifebril. Também foram padronizadas as condições ideais de crescimento de C. Violaceum e a produção do pigmento. O microrganismo demonstrou melhor crescimento e produção de violaceína, quando cultivado em meio de cultura Brain Heart Infusion (BHI) por 24h a 37°C. Foram estabelecidas as concentrações inibitória (125 μg/ml) e bactericida (2000 μg/ml) mínima do ácido salicílico frente a CV. O ácido salicílico em concentrações sub-inibitórias foi capaz de inibir a produção de violaceína e os resultados do método tradicional de leitura foram comparados com as realizadas pelo aplicativo Android PhotoMetrix. Os resultados obtidos demonstram que não há diferença significativa, entre os métodos de leitura, indicando que essas tecnologias podem ser grandes aliadas nas pesquisas, podendo ser bastante utilizadas como método de triagem, favorecendo a descoberta de novas substâncias com potente atividade de inibição de QS e antibiofilmes.
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