Emergência do grupo de pestivírus hobi-like e impacto no diagnóstico e controle do vírus da diarréia viral bovina
Abstract
O gênero Pestivirus é composto por quatro espécies virais: vírus da diarréia viral bovina tipos 1 e 2 (BVDV-1 e BVDV-2), vírus da peste suína clássica (CSFV) e vírus da doença da fronteira (BDV). Um novo grupo de pestivírus, provisoriamente denominado de HoBi-like, BVDV-3, ou pestivirus atípicos foi inicialmente identificado na Europa em uma amostra de soro fetal bovino (SFB) importada do Brasil. O vírus (ou grupo de vírus) HoBi-like possui similaridades ao nível genético e antigênico com o BVDV. A presente tese apresenta trabalhos de avaliação do impacto da emergência deste novo grupo de vírus no diagnóstico e controle do BVDV. Utilizando anticorpos monoclonais, verificou-se maior reatividade cruzada entre as espécies de pestivírus (BVDV-1; BVDV-2; e HoBi-like) em epitopos da glicoproteína Erns e proteína não-estrutural NS2/3, comparando com epitopos da glicoproteína E2. Assim, sugere-se que testes panpestivírus devem ser direcionados às proteínas Erns e NS2/3, enquanto testes específicos podem explorar diferenças existentes na glicoproteína E2. Por meio de um teste comercial de ELISA de captura de antígeno, verificou-se que o limiar de detecção do vírus HoBi_D32/00 é estatisticamente similar ao do BVDV. Entretanto, dois kits de ELISA para a detecção de anticorpos contra o BVDV falharam em detectar ao menos 20% dos animais soropositivos para HoBi_D32/00. Sugere-se a necessidade de reformular os testes diagnósticos para BVDV ou desenvolvimento de testes específicos. Da mesma forma, verificou-se que vacinas para BVDV-1 e BVDV-2 contendo antígenos inativados ou atenuados produzem uma proteção cruzada fraca contra o vírus HoBi-like. Os melhores resultados de proteção foram verificados com o uso de vacina viva atenuada, entretanto, o título médio geométrico (GMT) contra vírus HoBi-like foi de 12,9, enquanto para o BVDV-1 e BVDV-2 foram respectivamente, 51,1 e 23,5. Somado aos baixos títulos de anticorpos, a soroconversão verificada para o vírus HoBi-like foi de 68% dos animais, enquanto 100% e 94% para BVDV-1 e BVDV-2,
respectivamente. Relacionado ao diagnóstico e controle dos pestivírus, o comércio de SFB possui papel relevante na disseminação de agentes infecciosos. Composto por um homogeneizado do soro de centenas a milhares de fetos bovinos, lotes de SFB possuem alto potencial para a identificação de pestivírus circulantes na região de origem dos animais abatidos. Assim, foram testados lotes de SFB originados na América do Norte e manufaturados nos EUA ou na Europa. Apesar de vários lotes estarem contaminados com BVDV, não foi evidenciada a presença do vírus HoBi-like ou de anticorpos específicos em lotes produzidos nos EUA. Entretanto, foi detectada a presença do agente em dois lotes manufaturados na Europa, indicando a possibilidade de contaminação dessas amostras durante o processo de pooling e embalagem na Europa. Demonstra-se imprescindível a criação de regras internacionais relacionadas à certificação de origem do SFB, a implementação de testes padrão para a detecção de agentes, e adoção de medidas que impeçam a contaminação do produto durante o processamento. Verificou-se também a necessidade de incluir testes específicos para os vírus HoBi-like na rotina de testes utilizada para certificação de qualidade do SFB. Em resumo, os resultados demonstraram que os testes diagnósticos para BVDV frequentemente falham em detectar o vírus HoBi-like ou em diferenciar BVDV de HoBi-like vírus. Testes comerciais para detecção de anticorpos contra BVDV não detectam eficientemente animais expostos ao vírus HoBi-like. Da mesma forma, estudos in-vitro demonstram que a proteção cruzada contra o vírus HoBi-like conferida a animais vacinados para BVDV é limitada. Assim, medidas de detecção e controle para pestivírus devem incluir testes diagnósticos e vacinas específica para o vírus HoBi-like.