Multiplicação in vitro de Cedrela fissilis Vell.
Date
2006-02-24Metadata
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O presente trabalho teve como objetivo o estudo da regeneração in vitro de cedro (Cedrela fissilis Vell.), uma árvore nativa de interesse econômico, pertencente à família Meliaceae. Para a desinfestação de sementes, foram testadas diferentes concentrações e tempos de imersão em
hipoclorito de sódio e para a germinação, diferentes meios de cultura. Para o estabelecimento in vitro de segmentos nodais, foram adicionados ao meio de cultura WPM, reduzido a ¾ de sua concentração original, benlate (300 mg.l-1) e sulfato de estreptomicina (10 mg.l-1). Após, segmentos do nó
cotiledonar advindos de plântulas germinadas in vitro com 30 dias de idade, foram utilizados para a multiplicação de brotações nos meios de cultura MS e WPM, em combinação ou não com 5μM.l-1 de BAP ou KIN . Foi testado também, a influência da citocinina BAP (0; 1,25; 2,5 e 5,0 μM.l-1)
combinada ou não com as auxinas AIB ou ANA (0,5μM.l-1) em meio de cultura WPM durante dois subcultivos. Os segmentos do nó cotiledonar com 60 dias de cultivo em meio WPM e BAP (0; 1,25; 2,5 e 5,0 μM.l-1) foram transferidos para meio WPM adicionado apenas de GA3 a 3μM.l-1 permanecendo por mais 30 dias. Os resultados demonstram que as sementes desinfestadas com hipoclorito de sódio a 2% durante 10 minutos apresentaram a menor taxa de contaminação por
fungos (8,7%) e a maior percentagem de germinação (80%), os meios MS e WPM proporcionaram percentagem de germinação de 72,5%. Os segmentos nodais de plantas de três anos de idade apresentaram uma taxa média de contaminação por bactérias de 13% após 21 dias de inoculação quando cultivados em meio de cultura WPM adicionado de benlate (300mg.l-1)mais sulfato de
estreptomicina (10 mg.l-1)e taxa de sobrevivência de 83%. Os explantes provenientes da região do nó cotiledonar apresentaram regeneração média de brotações de 2,8 quando cultivados em meio WPM suplementado com BAP a 5μM.l-1, enquanto que, no meio MS, a taxa média de brotações foi de 2,5 por explante. Quanto testados em meio de cultura WPM, em diferentes concentrações de BAP, apenas aos 30 dias de cultivo, houve interação entre as doses da citocinina e a presença das auxinas AIB e ANA. O BAP a 5μM apresentou explantes com maiores taxas de multiplicação de brotações
independente da adição das auxinas ao meio de cultura. Nos subcultivos subseqüentes, não houve interação entre as concentrações e o efeito da presença de auxina, em que o meio sem a presença desta, adicionado o BAP a 5μM, proporcionou a maior média de brotações por explante 2,29 (60 dias). O número médio de nós aos 30 dias de cultivo foi de 2,84 no meio contendo ANA mais 2,5 μM de BAP. Enquanto que, aos 60 dias, o meio de cultura sem auxina proporcionou uma média de 4,15 nós por explante, diferindo estatisticamente dos meios contendo auxina. Aos 90 dias de cultivo, o número de nós foi de 5,59 quando utilizado BAP a 5μM mais AIB ao meio de cultura. Quanto ao comprimento médio das brotações, o meio contendo ANA mostrou ser o mais eficiente (0,86 cm) aos 30 dias de cultivo. Aos 60 dias, o comprimento médio das brotações foi de 0,95 e, aos 90 dias o
comprimento médio de brotações foi de 1,14. A formação de calos na base dos explantes ocorreu quando foi adicionada citocinina ao meio, e a formação de raízes ocorreu na ausência desta e na presença de auxina, gerando plantas completas. Explantes expostos ao GA3 aos 60 dias de cultivo
mostraram parcial reversão, apresentando um aumento na percentagem de raízes formadas e comprimento médio de brotações.