Análise genética e antigênica do ectodomínio da glicoproteína E2 de pestivírus isolados de bovinos no Rio Grande do Sul, Brasil
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Data
2020-02-20Primeiro membro da banca
Lima, Marcelo de
Segundo membro da banca
Brum, Mário Celso Sperotto
Metadata
Mostrar registro completoResumo
Os pestivírus de bovinos, vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (bovine viral diarrhea virus, BVDV-1, BVDV-2) e
pestivírus Hobi-like (HoBiPeV) estão associados com várias manifestações clínicas e reprodutivas produzindo
perdas importantes para a bovinocultura. Os isolados de campo apresentam uma grande variabilidade genética e
antigênica, especialmente na glicoproteína E2 do envelope viral. Essa variabilidade pode comprometer o
diagnóstico molecular e/ou imunológico e estratégias de formulação vacinal e imunização. Assim, este estudo
realizou uma análise genética e antigênica de 51 isolados de pestivírus obtidos de bovinos de corte no Rio
Grande do Sul, Brasil, no ano de 2017. Inicialmente, os isolados foram identificados por PCR e confirmados por
sequenciamento e análise filogenética da região 5’UTR do genoma, complementando uma análise realizada
anteriormente em uma região mais abrangente da 5’UTR. A seguir, os isolados foram submetidos à testes de
reatividade com 11 anticorpos monoclonais (MAbs) para a glicoproteína E2, seguido do sequenciamento e
análise do domínio DA do ectodomínio da E2. A partir das sequências de nucleotídeos da região 5’UTR foram
identificados 27 isolados de BVDV-1 (22 de -1a e 5 de -1b), 23 isolados de BVDV-2 (todos -2b) e um isolado de
HobiPeV(-3a). Essa subtipagem correspondeu a um estudo anterior que caracterizou toda a porçao da 5'UTR. A
análise de sequências (nucleotídeos e aminoácidos) do domínio DA da E2 identificou várias alterações de
aminoácidos, observadas principalmente nos sítios imunodominantes, locais onde há uma maior exposição aos
anticorpos. Os resíduos que apresentaram maior variabilidade foram nas posições: 695 e 782 do genoma do
pestivírus bovino. Esses locais já haviam sido descritos anteriormente por apresentarem uma alta taxa de
mutações e trocas de aminoácidos, provavelmente por serem importantes epítopos e alvos de anticorpos. Em
menor número, foram observadas mutações na posição 701 e 734. Os testes de reatividade com MAbs revelaram
uma variabilidade marcante na maioria dos epítopos da E2. Enquanto alguns MAbs reconheceram quase todos os
isolados, confirmando a existência de epítopos altamente conservados na E2, vários MAbs reconheceram poucos
ou mesmo nenhum isolado. Assim, o presente estudo fornece informações importantes referentes a variabilidade
genética e antigênica do domínio DA da E2 entre isolados de campo de pestivírus bovinos. Essas informações,
por sua vez, podem ser úteis para o diagnóstico molecular, imunológico e também para embasar as estratégias de elaboração de vacinas.
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