dc.creator | Tondolo, Juliana Simoni Moraes | |
dc.date.accessioned | 2019-08-29T17:52:15Z | |
dc.date.available | 2019-08-29T17:52:15Z | |
dc.date.issued | 2016-03-28 | |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufsm.br/handle/1/18079 | |
dc.description.abstract | Conidiobolomycosis and pythiosis are important infections that affect animals and humans, which
presents difficulties in diagnosis and treatment. The conidiobolomycosis is caused by the fungi Conidiobolus
coronatus, C. incongruus and C. lamprauges, affecting sheep, horses, dogs and humans; pythiosis is caused by the
oomycete Pythium insidiosum and affects wild and domestic mammals, particularly horses and humans. There is
no standard pharmacological approach to the treatment of infections and the surgical rescission is a method often
needed in both cases. In this context, this thesis aimed to (a) determine the in vitro susceptibility of C. lamprauges
against different antimicrobial drugs, as well as identify possible synergistic associations; (b) the use of
standardized disk diffusion technique with minocycline as a screening method for the presumptive identification
of P. insidiosum; (c) quantify, extract and evaluate the immunomodulatory potential of β-glucans from P.
insidiosum in vitro in cell cultures in vitro and in mice; (d) develop an experimental pythiosis model in mice and
evaluate the immune response to infection. As results we achieved: i) assessing the in vitro susceptibility of C.
lamprauges isolated from sheep infections, there is reduced susceptibility to most antimicrobial drugs tested, with
terbinafine the drug with improved activity (MIC <0.06- 0.5 μg/mL). The highest rates of synergism were observed
with the combination of sulfamethoxazole and trimethoprim (100%) and between the terbinafine with azole
antifungal drugs (71%); ii) the standardization of the use of disk diffusion technique with minocycline disks as a
screening method for the presumptive identification of P. insidiosum was effective because there was no mycelial
growth of P. insidiosum around the minocycline disk during the seven days of incubation, thus differentiating it
from C. lamprauges and other true fungi; iii) β-glucan content from P. insidiosum enzymatically assessed was
23.09 ± 3.71% of total glucan, divided into α-glucans (4.10 ± 0.83%) and β-glucans (18.99 ± 3.59); iv) β-glucan
extract from P. insidiosum yielded an extract containing 82% of β-glucans and 18% of residual amino acids and
peptides, and the structural analysis revealed that it was a (1,3)(1,6)-β-glucan; This (1,3)(1,6)-β-glucan
demonstrates a potential to stimulate the immune system in vitro, as observed by the increase in equine, human
and mouse lymphocyte proliferation and ability to induce Th17 type response when administered to mice; vi) the
use of BALB/c mice immunosuppressed with cyclophosphamide and hydrocortisone association was shown to be
an effective experimental model for the study of pythiosis, with 60% of mortality; vii) The cytokine production
observed during the development of the experimental pythiosis in mice was characterized by an expression of IL6,
IL-10 and TNF-α, indicating an inflammatory response and possible suppression of the host immune response as
responsible for the infection property. | eng |
dc.language | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de Santa Maria | por |
dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | * |
dc.subject | Conidiobolus lamprauges | por |
dc.subject | Suscetibilidade | por |
dc.subject | β-glucanas | por |
dc.subject | Imunoterapia | por |
dc.subject | Susceptibility | eng |
dc.subject | β-glucans | eng |
dc.subject | Immunotherapy | eng |
dc.subject | Pythium insidiosum | eng |
dc.title | Aspectos fisiológicos e imunológicos de Pythium insidiosum e atividade de antimicrobianos frente a Conidiobolus lamprauges | por |
dc.title.alternative | Physiological and immunological aspects of Pythium insidiosum and antimicrobial activity of antimicrobial agents against Conidiobolus lamprauges | eng |
dc.type | Tese | por |
dc.description.resumo | A conidiobolomicose e a pitiose são infecções importantes que acometem animais e humanos e que
apresentam dificuldades tanto no diagnóstico quanto no tratamento. A conidiobolomicose é causada pelos fungos
Conidiobolus coronatus, C. incongruus e C. lamprauges, afetando ovinos, equinos, caninos e humanos, já a pitiose
é causada pelo oomiceto Pythium insidiosum e atinge mamíferos selvagens e domésticos, principalmente equinos,
e humanos. Não existe uma abordagem farmacológica padrão para o tratamento dessas infecções e em ambos os
casos a rescisão cirúrgica é uma abordagem muitas vezes necessária. Neste contexto, esta tese objetivou (a)
determinar a suscetibilidade in vitro de C. lamprauges frente a diferentes fármacos antimicrobianos, bem como
identificar possíveis associações sinérgicas; (b) padronizar o uso da técnica de disco difusão utilizando a
minociclina como um método de screening para a identificação presuntiva de P. insidiosum; (c) quantificar, extrair
e avaliar o potencial imunomodulador das β-glucanas de P. insidiosum in vitro em cultivo de linfócitos e in vivo
em camundongos; (d) desenvolver um modelo experimental de pitiose em camundongos e avaliar a resposta
imunológica à infecção. Como resultados obtivemos: i) na avaliação da suscetibilidade in vitro de C. lamprauges
isolados de infecções em ovinos, observou-se uma suscetibilidade reduzida a maioria dos fármacos testados, sendo
a terbinafina o fármaco com melhor atividade (CIM < 0,06-0,5 μg/mL). As maiores taxas de sinergismo foram
observadas com a associação de sulfametoxazol com trimetoprima (100%) e entre terbinafina com fármacos
antifúngicos azólicos (71%); ii) a padronização do uso da técnica de disco difusão com discos de minociclina como
um método de screening para a identificação presuntiva de P. insidiosum mostrou-se eficaz, pois não houve
crescimento miceliano de P. insidiosum em torno do disco de minociclina durante os sete dias de incubação,
diferenciando-o assim de C. lamprauges e outros fungos verdadeiros; iii) o conteúdo de β-glucanas de P.
insidiosum avaliado enzimaticamente foi de 23,09% ± 3,71 de glucanas totais, divididas em α-glucanas (4,10% ±
0,83) e β-glucanas (18,99% ± 3,59); iv) a extração de β-glucanas de P. insidiosum produziu um extrato contendo
82% de β-glucanas e 18% de aminoácidos e peptídeos residuais e a análise estrutural mostrou tratar-se de uma
(1,3)(1,6)- β-glucana; v) esta (1,3)(1,6)- β-glucana demonstrou potencial para estimular o sistema imune in vitro
observado pelo aumento na proliferação de linfócitos de equinos, humanos e camundongos e de induzir resposta
do tipo Th17 quando administrada aos camundongos; vi) o uso de camundongos BALB/c imunossuprimidos com
a associação de ciclofosfamida e hidrocortisona mostrou ser um modelo experimental eficaz para o estudo da
pitiose, com mortalidade de 60% dos animais infectados; vii) a produção de citocina observada durante o
desenvolvimento da pitiose experimental em camundongos caracterizou-se pela expressão de IL6, IL-10 e TNF-
α, indicando uma resposta inflamatória e uma possível supressão da resposta imune do hospedeiro como
responsável pelo estabelecimento da infecção. | por |
dc.contributor.advisor1 | Santurio, Janio Morais | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/6316012260769979 | por |
dc.contributor.referee1 | Leal, Daniela Bitencourt Rosa | |
dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/3639683273462361 | por |
dc.contributor.referee2 | Mario, Débora Alves Nunes | |
dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/0731595522786356 | por |
dc.contributor.referee3 | Zanette, Régis Adriel | |
dc.contributor.referee3Lattes | http://lattes.cnpq.br/3166371422900794 | por |
dc.contributor.referee4 | Alves, Sydney Hartz | |
dc.contributor.referee4Lattes | http://lattes.cnpq.br/0330782478769631 | por |
dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/3264475114009152 | por |
dc.publisher.country | Brasil | por |
dc.publisher.department | Farmacologia | por |
dc.publisher.initials | UFSM | por |
dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Farmacologia | por |
dc.subject.cnpq | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA | por |
dc.publisher.unidade | Centro de Ciências da Saúde | por |