dc.creator | Dornelles, Rafaela Castro | |
dc.date.accessioned | 2022-08-25T17:19:30Z | |
dc.date.available | 2022-08-25T17:19:30Z | |
dc.date.issued | 2022-07-22 | |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufsm.br/handle/1/25979 | |
dc.description.abstract | Medicinal plants are used both in chemoprevention and in the treatment of a disease after it has already
been installed. In general, despite the wide use, knowledge about the phytochemical composition,
biological activities, toxicity and mechanisms of action are still poorly explored. In this context,
Richardia brasiliensis Gomes (Rubiaceae), it is known as “poaia-branca”, found in practically all
continents, appearing in Brazil mainly in regions where there are agricultural activities. It is popularly
used in the treatment of diabetes, hemorrhoids, eczema, burns, among others. Despite this, few data
regarding its phytochemical constitution and its pharmacological action were found. Thus, the aim of
this study was to identify bioactive compounds present in the extracts, through different
chromatographic methods; to determine the antioxidant capacity in vitro, using the DPPH, antihemolysis and ORAC assays; to evaluate oxidative parameters such as TBARS, ROS and NO; genotoxic
and cytotoxic such as cell viability by the MTT method, double-stranded DNA quantification by the
PicoGreen® assay and single-stranded by the Comet DNA method in leukocyte and PBMCs. Besides to
analyze the antiproliferative capacity in different tumoral (A375, MCF-7, HeLa, HT-29 and U87) and
no-tumor (3T3) cell lines, and to perform acute and repeated dose toxicity analyses in an animal model,
following OECD protocols. In the phytochemical screening, the following were identified: anthocyanin
heterosides, gums, mucilages, tannins, amino groups, steroids and/or triterpenes, alkaloids, phenols,
coumarins, organic acids and flavonoids. Through the different chromatographic methods used, fourteen
polyphenols were identified, highlighting the presence of rutin and chlorogenic acid. Alkaloids and
terpenes were also secondary metabolism compounds highlighted in both aerial and root extracts. In the
determination of metabolites, there was a difference in the different seasons, with the highest
concentrations of total polyphenols occurring in spring extracts, flavonoids in autumn, but without
differing from winter and spring, and tannins were found in high concentrations in summer. When the
extracts were submitted to the evaluation of the antioxidant capacity, the responses were different in the
methods used, showing a pronounced antioxidant effect in the anti-hemolysis and ORAC assays.
Regarding the oxidative, genotoxic and cytotoxic parameters, there were some changes, especially at
higher concentrations. In the evaluation of the antiproliferative capacity, the extract of R. brasiliensis
was promising, reducing cell viability by about 95% in human melanoma cells (A375) and it was
observed that the phytochemicals present in the extract were able to activate mechanisms that led the
cells to apoptosis. In the acute oral toxicity test and in repeated doses, there was no mortality and the
animals did not show signs of toxicity during the treatment period. The changes in hematological and
biochemical parameters found are within the standards for the species. Thus, the results obtained showed
the main substances of secondary plant metabolism responsible for the biological activities attributed to
the species R. brasiliensis, demonstrating that the extracts are effective against tumor cell lines, with
greater effectiveness against A375. However, under conditions in which the research was performed,
the extracts showed some alterations that may be indicating a certain degree of in vitro toxicity in
leukocyte cells and in PBMCs. Moreover, in vivo tests suggest that the species is safe for use by the
population, however, more long-term toxicity studies are needed to confirm these data. | eng |
dc.language | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de Santa Maria | por |
dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | * |
dc.subject | Poaia-branca | por |
dc.subject | Compostos bioativos | por |
dc.subject | Rubiaceae | por |
dc.subject | Antioxidante | por |
dc.subject | Antiproliferativo | por |
dc.subject | Bioactive compounds | eng |
dc.subject | Rubiaceae | eng |
dc.subject | Antioxidant | eng |
dc.subject | Antiproliferative | eng |
dc.title | Richardia brasiliensis Gomes: composição fitoquímica, atividade biológica e toxicidade | por |
dc.title.alternative | Richardia brasiliensis Gomes: phytochemical composition, biological activity and toxicity | eng |
dc.type | Tese | por |
dc.description.resumo | Plantas medicinais são utilizadas tanto na quimioprevenção quanto no tratamento de uma doença após
esta já ter sido instalada. No geral, apesar do amplo uso, o conhecimento a respeito da composição
fitoquímica, atividades biológicas, toxicidade e mecanismos de ação ainda são pouco exploradas. Neste
contexto, Richardia brasiliensis Gomes (Rubiaceae) é conhecida como “poaia-branca” e encontrada
praticamente em todos os continentes, aparecendo no Brasil, principalmente em regiões onde há
atividades agrícolas. É utilizada popularmente no tratamento do diabetes, hemorroidas, eczemas,
queimaduras, dentre outros. Apesar disso, poucos dados a respeito de sua constituição fitoquímica e sua
ação farmacológica foram encontrados. Assim, o objetivo deste trabalho foi identificar compostos
bioativos presentes nos extratos, através de diferentes métodos cromatográficos; determinar a
capacidade antioxidante in vitro, utilizando os ensaios de DPPH, anti-hemólise e ORAC; avaliar
parâmetros oxidativos como TBARS, EROs e ON; genotóxicos e citotóxicos como a viabilidade celular
pelo método MTT, quantificação de dupla fita de DNA através do ensaio do PicoGreen® e de fita simples
pelo método do DNA Cometa em leucócitos e PBMCs. Além de analisar a capacidade antiproliferativa
em diferentes linhagens tumorais (A375, MCF-7, HeLa, HT-29 e U87) e não tumorais (3T3), e realizar
análises de toxicidade aguda e em doses repetidas em modelo animal, seguindo protocolos da OECD.
No screening fitoquímico foram identificados: heterosídeos antociânicos, gomas, mucilagens, taninos,
amino-grupos, esteroides e/ou triterpenos, alcaloides, fenóis, cumarinas, ácidos orgânicos e flavonoides.
Através dos diferentes métodos cromatográficos utilizados, foram identificados quatorze polifenois com
destaque para a presença de rutina e ácido clorogênico. Alcaloides e terpenos também foram compostos
do metabolismo secundário com destaque tanto em extratos das partes aéreas quanto das raízes. No
doseamento dos metabólitos, houve diferença nas diferentes estações, sendo que as maiores
concentrações de polifenois totais ocorreram nos extratos de primavera, flavonoides no outono, porém
sem diferir do inverno e da primavera e taninos foram encontrados em alta concentrações no verão.
Quando os extratos foram submetidos à avaliação da capacidade antioxidante, as respostas foram
diferentes nos métodos utilizados, apresentando pronunciado efeito antioxidante nos ensaios da antihemólise e ORAC. Em relação aos parâmetros oxidativos, genotóxicos e citotóxicos, alterações foram
observadas principalmente nas concentrações mais elevadas. Na avaliação da capacidade
antiproliferativa, o extrato de R. brasiliensis foi promissor, reduzindo a viabilidade celular em cerca de
95% em células de melanoma humano (A375) e foi observado que os fitoquímicos presentes no extrato
foram capazes de ativar mecanismos que levaram as células à apoptose. No ensaio da toxicidade oral
aguda e em doses repetidas, não houve mortalidade e os animais não apresentaram sinais de toxicidade
durante o período dos tratamentos. Foram observadas alterações em parâmetros hematológicos e
bioquímicos, que estão dentro dos padrões para a espécie. Assim, os resultados obtidos apresentaram as
principais substâncias do metabolismo secundário vegetal responsáveis pelas atividades biológicas
atribuídas à espécie R. brasiliensis, demonstrando que os extratos são efetivos contra linhagens celulares
tumorais, com maior efetividade contra A375. No entanto, nas condições na qual a pesquisa foi
desenvolvida, os extratos apresentaram algumas alterações que podem estar indicando certo grau de
toxicidade in vitro em células leucocitárias e em PBMCs. Ademais, os ensaios in vivo sugerem que a
espécie é segura para uso pela população, porém mais estudos de toxicidade a longo prazo, são
necessários para afirmar esses dados. | por |
dc.contributor.advisor1 | Bauermann, Liliane de Freitas | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/5849925846135968 | por |
dc.contributor.referee1 | Cadoná, Francine Carla | |
dc.contributor.referee2 | Santos, Gabriela Trevisan dos | |
dc.contributor.referee3 | Dalcol, Ionara Irion | |
dc.contributor.referee4 | Garlet, Quelen Iane | |
dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/8898700601974597 | por |
dc.publisher.country | Brasil | por |
dc.publisher.department | Farmacologia | por |
dc.publisher.initials | UFSM | por |
dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Farmacologia | por |
dc.subject.cnpq | CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::FARMACOLOGIA | por |
dc.publisher.unidade | Centro de Ciências da Saúde | por |