Congelamento ultra-rápido de embriões bovinos com etilenoglicol e trealose
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Data
2001-03-16Primeiro membro da banca
Alvarenga, Fernanda da Cruz Landim
Segundo membro da banca
Silva, Carlos Antonio Mondino
Metadata
Mostrar registro completoResumo
A criopreservação de embriões é um procedimento amplamente empregado na reprodução assistida dos animais domésticos e sua importância na espécie bovina é representativa visto que somente na América do Norte, acima de 40% dos embriões coletados estão congelados pelo método convencional. Em contraste com o avanço biotecnológico, os equipamentos disponíveis no mercado ainda possuem um custo extremamente elevado. Com a finalidade de minimizar custos e o tempo de congelamento, esta pesquisa avaliou o efeito do etilenoglicol associado a trealose sobre embriões bovinos produzidos in vivo, congelados pelo método ultra-rápido cuja técnica dispensa equipamentos de alto valor comercial. O baixo peso molecular do etilenoglicol lhe confere uma alta permeabilidade e baixa toxicidade e sua associação com a trealose em concentrações adequadas possibilita a diminuição do tempo de congelamento com a exposição rápida e direta da palheta com o embrião ao nitrogênio líquido. Noventa e um (n= 91) embriões bovinos produzidos in vivo foram congelados pelo método ultra-rápido com etilenoglicol e trealose e pelo método convencional. Os embriões foram distribuídos aleatoriamente em dois experimentos compostos por três tratamentos cada. No Experimento I, os embriões congelados pelo método ultra-rápido foram expostos por 2 minutos ao vapor de N2 antes de serem imersos no nitrogênio líquido. Vinte e nove embriões foram expostos à solução 2,0M de etilenoglicol + 0,3M trealose em PBS + 0,4% BSA (T1), 24 embriões foram congelados com 3,0M de etilenoglicol + 0,3M trealose em PBS + 0,4% BSA (T2) e 19 embriões congelados pelo método convencional com 1,5M de etilenoglicol em Emcare (T3=controle). No experimento II foram utilizadas as mesmas soluções e tratamentos, entretanto o tempo de exposição dos embriões ao vapor de N2 foi de 20 segundos. Sete embriões foram expostos a 2,0M etilenoglicol + 0,3M trealose em PBS + 0,4% BSA (T1), 5 submetidos a 3,0M etilenoglicol + 0,3M trealose em PBS + 0,4% BSA (T2) e 7 congelados pelo método convencional com 1,5M etilenoglicol em Emcare (T3=controle). Após o descongelamento, todos os embriões foram transferidos para receptoras previamente sincronizadas, resultando num índice de prenhez aos 45 dias de 17% (T1), 13% (T2) e 37% (T3 = controle) no Experimento I, e de 14% (T1), 40% (T2) e 43% (controle) no Experimento II não tendo sido detectadas diferenças significativas (P>0,05) entre os tratamentos. A trealose mostrou-se viável para o congelamento ultra-rápido de embriões bovinos destinados a transferência direta. A associação do etilenoglicol 3,0M com trealose 0,3M para o congelamento ultra-rápido de embriões bovinos e a exposição por 20 segundos ao vapor N2 líquido sugerem perspectivas promissoras para aplicação desta metodologia para a espécie bovina.
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