Interação YAP1-TEAD regula a cascata de sinalização do EGF em células do cumulus em bovinos
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2020-02-07Metadatos
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O mecanismo de expansão das células do cumulus (CC) e ovulação in vivo é desencadeado pelo pico de LH nas células da granulosa e CC, culminando com uma série de comunicações parácrinas e autócrinas entre estas células ovarianas. Está estabelecido que fatores secretados pela granulosa atuam sobre as CC estimulando a transcrição de genes importantes para a expansão, maturação oocitária e ovulação. Embora já sejam conhecidas diversas vias de sinalização envolvidas com esse processo, ainda não se tem o completo entendimento. Recentemente, a via de sinalização Hippo e seus efetores (YAP1 e TAZ) vêm sendo relacionados com diferentes contextos da fisiologia ovariana, inclusive com o processo ovulatório, em camundongos e humanos. Porém, ainda são escassos os estudos relacionando essa via com espécies de produção. O objetivo deste estudo foi demonstrar a função da ligação YAP1 com fatores de transcrição TEAD na modulação de genes-chave para a expansão e mecanismo ovulatório nas células do cumulus de bovinos e a sua regulação. Para isso, complexos cumulus-oócito (CCO) foram cultivados in vitro durante 0 e 12h e submetidos a imunofluorescência para demonstrar a localização intracelular de YAP1 e pYAP1. Os resultados sugerem que YAP1 transloca do citoplasma para o núcleo das CC durante o processo de maturação in vitro (MIV). Para elucidar a regulação de YAP1, receptores de EGF (EGFR; com AG 1478) foram inibidos e então, os CCOs foram estimulados com EGF ou FSH. Com isso, foi demonstrado que a inibição de EGFR resulta na redução da expressão de YAP1 e CTGF (um dos principais genes-alvo de YAP1-TEAD) nas CC. Então, os CCOs foram tratados com diferentes concentrações de verteporfina, um inibidor da interação YAP1-TEAD e obteve-se a redução de maneira concentração-dependente de genes-chave para a expansão (HAS2 e PTX3) e ovulação (ADAM17, EREG e PTGS2) nas CC. A interação YAP1-TEAD está envolvida na expressão de genes-chave para a expansão e mecanismo ovulatório em células do cumulus de bovinos e a regulação de YAP1 é mediada através da estimulação de EGFR, por ação direta de EGF, ou indireta de FSH.
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