EXPRESSÃO DE GENES DE MEDIADORES CITOTÓXICOS POR CMSP TRATADAS COM PASTAS ENDODÔNTICAS INDICADAS PARA DENTES DECÍDUOS
Visualizar/
Data
2015-08-14Autor
Nakashima, Brenda Lanza 
Primeiro orientador
Praetzel, Juliana Rodrigues
Primeiro membro da banca
Sagrillo, Michele Rorato
Segundo membro da banca
Oliveira, Marta Dutra Machado
Metadata
Mostrar registro completoResumo
Pastas iodoformadas (PI) e a base de hidróxido de cálcio (PH) são empregadas na pulpectomia de dentes decíduos, complementando a ação antimicrobiana do preparo químico mecânico e favorecendo o reparo tecidual. Essas pastas ocupam e permanecem por um período de tempo ao longo do canal radicular, entrando em contato com a região periapical e tecidos adjacentes, tornando-se o objetivo deste estudo quantificar a expressão relativa de genes de toxicidade manifestados pelas pastas, de forma a avaliar a biocompatibilidade das mesmas. Pelo ensaio RT-PCR, foram analisados mecanismos celulares induzidos ou gerados por extratos das pastas endodônticas: PI com Nebacetin (PNEB); com Maxitrol (PMAX); com Clorexidina (PCHX); e Guedes-Pinto (PGP); e PH: Calen® espessada com Oxido de Zinco (Calen®/ZOE); e pasta de Hidróxido de Cálcio com Clorexidina (PHCHX); Ultracal®XS, frente às células mononucleares do sangue periférico humano (CMSP), de forma a quantificar a expressão gênica relativa dos mediadores citotóxicos: Granzima A, Granzima B, Granulisina e Perforina. Previamente à expressão gênica, para analisar aspectos da viabilidade celular, foram realizados ensaios MTT, LDH e atividade de Caspases. Após teste de normalidade Kolmogorov-Smirnov, os resultados foram tratados por ANOVA de uma via e Tukey, com p<0,05. A PNEB foi a única pasta que expressou todos os mediadores citotóxicos avaliados (p<0.05). Com relação à viabilidade celular, a PNEB apresentou aumento de Caspases 1 e 8 (p<0.05); A PGP levou ao aumento das Caspases 1, 3 e 8 (p<0.05); A PCHX diminuiu a viabilidade celular no MTT e LDH, além de apresentar aumento da atividade de todas as Caspases (p<0.05). Nas PH, somente a Ultracal®XS apresentou valores de concentração significativos para Caspase 1, 3 e 8 (p<0.05). Apesar da PNEB ter apresentado elevada expressão gênica relativa de todos os mediadores citotóxicos analisados, não causou diminuição da viabilidade celular, não ocasionando aumento da atividade da Caspase 3 (efetora da apoptose), demonstrando biocompatibilidade. Dentre as PI que apresentaram melhor biocompatibilidade sob o aspecto de citotoxicidade foram a PGP e PMAX. O material com potencial citotóxico verificado neste experimento foi a PCHX, pois diminuiu drasticamente a viabilidade celular, confirmada em dois ensaios e corroborada pela alta atividade de todas as Caspases analisadas, e ainda, devido à morte celular, a incapacidade de expressão gênica. Todas as PH desempenharam comportamento citocompatível, de acordo com os ensaios realizados e à luz da biologia molecular.