Carbúnculo sintomático: abordagem diagnóstica e imunológica
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Date
2011-02-24Author
Farias, Luana D'avila 
Primeiro orientador
Vargas, Agueda Palmira Castagna de
Primeiro membro da banca
Costa, Mateus Matiuzzi da
Segundo membro da banca
Botton, Sonia de Avila
Metadata
Show full item recordAbstract
O carbúnculo sintomático é uma infecção aguda e geralmente fatal que acomete principalmente os bovinos, cujo agente etiológico é Clostridium chauvoei. Neste estudo foram apresentados dois experimentos, o primeiro com o objetivo de facilitar a coleta e armazenamento de material em papel filtro comum, para diagnóstico laboratorial do carbúnculo sintomático por PCR (polymerase chain reaction) direta. Para isto, foram testadas, in vitro, a sensibilidade, especificidade e viabilidade do método em decorrência do tempo e à temperatura ambiente. Para o teste de viabilidade, foram utilizados os tecidos hepáticos de doze bovinos, sendo dez impregnados com uma suspensão de C. chauvoei. Os testes foram realizados nos períodos de 24h, 48h, 72h e uma semana após impregnação do papel filtro comum armazenado à temperatura ambiente. A sensibilidade da técnica não foi comprometida com o uso do papel filtro comum. Não foram observadas reações cruzadas e amplificações a partir das amostras controle negativas. A PCR direta do papel filtro comum apresentou amplificação em 50% das amostras nas 24h, 100% nas 48h, 70% nas 72h e 90% no período de uma semana de armazenamento à temperatura ambiente. Este método demonstrou ser uma alternativa prática e econômica para coleta, armazenamento e remessa de material para diagnóstico molecular de carbúnculo sintomático. O segundo experimento teve como objetivo verificar a eficiência da imunização proporcionada por duas vacinas clostridiais polivalentes (vacinas A e B) testadas frente à cepa de campo (SBP 07/09) e a cepa de referência (MT) de C. chauvoei. Os testes ocorreram por meio do desafio em cobaias imunizadas, utilizado oficialmente pelo Ministério da Agricultura Pecuária e Abastecimento (MAPA) e posteriormente foi avaliada a resposta humoral dos animais pelo teste de ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). Ao final do experimento, todas as cobaias vacinadas estavam vivas e sem sinais clínicos da doença, enquanto os animais dos grupos controle apresentaram sinais característicos da doença e morreram no período de 24 a 48 horas. As vacinas testadas foram eficientes em estimular resposta humoral tanto frente à cepa de campo de C. chauvoei quanto frente à cepa de referência MT. Quanto à resposta humoral evidenciada pelo ELISA, os quatro grupos vacinados e desafiados soroconverteram após a vacinação e os animais do grupo controle permaneceram soronegativos. Contudo, os animais imunizados com a vacina B apresentaram maiores níveis de anticorpos detectados quando comparados com os animais imunizados com a vacina A. O presente trabalho trouxe contribuições no processo de prevenção e desenvolvimento de métodos diagnósticos para o carbúnculo sintomático, uma relevante doença, tanto do ponto de vista econômico quanto da saúde animal.