Produção in vitro de embriões bovinos com cisteamina
Fecha
2006-02-21Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
As biotécnicas reprodutivas atuais utilizam como suporte para outros estudos a produção
in vitro (PIV) de embriões bovinos, conduzida em três etapas igualmente importantes:
maturação in vitro (MIV), fecundação in vitro (FIV) e cultivo in vitro (CIV). Nesta pesquisa
avaliou-se o efeito da cisteamina, um componente thiol, nos meios de maturação,
fecundação ou de cultivo sobre o desenvolvimento embrionário. Complexos cumulusoócitos
(CCO=oócitos) coletados de ovários de vacas Bos taurus indicus provenientes
de frigorífico foram selecionados e distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: Grupo
Controle (sem cisteamina, n=488), Cisteamina na maturação (n=487), Cisteamina na
fecundação (n=489) e Cisteamina no cultivo (n=493). Os oócitos dos quatro grupos
foram maturados por 24h em TCM-199 modificado acrescido de 0,01UI/mL rFSHh +
0,05mg/mL de LH e 10% de SFB. No grupo cisteamina-maturação, o meio TCM-199 foi
suplementado com 150μM de cisteamina. Os oócitos foram maturados a 38,5ºC em
estufa com 5%CO2 em ar e umidade saturada. A FIV (D0=dia da fecendação) foi
realizada por 18-22 horas em meio Fert-Talp acrescido de heparina e PHE. Este meio
utilizado no grupo cisteamina-fecundação foi adicionado de 150μM de cisteamina. Para
capacitação, o sêmen foi descongelado e processado através do Gradiente de Percoll e
a inseminação foi realizada com 2x106 espermatozóides/mL, nas mesmas condições
atmosféricas da MIV. Os prováveis zigotos de todos grupos experimentais foram
cultivados em meio SOF suplementado com 5% SFB. No grupo cisteamina-cultivo o
meio SOF foi acrescido de 150μM de cisteamina. A atmosfera gasosa nos 8 dias de
cultivo foi de 5% de CO2, 5% de O2 e 90% de N2 e umidade saturada. A clivagem foi de
86, 89, 88 e 90%, obtendo-se 29, 31, 38 e 35% de blastocistos em D7 e 21, 23, 27 e
29% de eclosão para os grupos controle, maturação, fecundação e cultivo,
respectivamente. Em meio de fecundação (Fert-Talp) ou em meio de cultivo (SOFaaci) a
cisteamina promove maior produção embrionária. O uso da cisteamina nos programas
comerciais de OPU/PIV poderá contribuir para melhor eficiência da produção
embrionária.