Efeitos da radiação ionizante na maturação de oócitos bovinos: busca por modelos de estudo em radiobiologia
Abstract
A aplicação médica da radiação ionizante (RI) na radioterapia tem sido crucial no tratamento
de diversos tipos de câncer devido a sua ação lesiva as células tumorais, decorrente da interação direta
com as moléculas de DNA ou indireta com as moléculas de H2O (radiólise, produzindo Espécies
Reativas do Oxigênio). Ambas as interações podem induzir mutações gênicas e quebras na estrutura
física do DNA, induzindo a morte celular. Entretanto, em decorrência do tratamento radioterápico,
também podem ocorrer danos as células saudáveis. Mulheres tratadas com irradiação abdominal,
pélvica ou irradiação total do corpo, podem apresentar danos permanentes ao ovário e perda dos
folículos primordiais, resultando em disfunção uterina, menopausa precoce, abortos espontâneos e
infertilidade. Visando investigar os possíveis danos as células saudáveis gerados no tratamento
radioterápico e suas consequências, neste estudo foram irradiados ovários bovinos, os quais
constituem um bom modelo de estudo para eventos reprodutivos na mulher. Em um primeiro
experimento, após a irradiação dos ovários (doses de 0,9 Gy, 1,8 Gy, 3,6 Gy e 18,6 Gy), oócitos foram
selecionados e cultivados por 24h, momento no qual foi efetuada análise da maturação nuclear. Em um
segundo experimento, após a irradiação dos ovários (1,8 Gy e 18,6 Gy), oócitos foram selecionados e
cultivados por 1h, momento no qual avaliou-se a frequência de danos no DNA por meio da detecção
de imunofluorescência da histona H2AX fosforilada (γH2AX). No mesmo momento (1h), células do
cumulus foram separadas para análise da expressão de genes envolvidos nos mecanismos de reparo do
DNA (53BP1, RAD52, ATM, Ku70 e Ku80), apoptose (BAX) e controle do ciclo celular (CCND2)
através das técnicas de extração de RNA e qRT-PCR. Os resultados mostraram que as doses de
radiação testadas não afetam a taxa de maturação nuclear dos oócitos, sendo que não foi possível
detectar danos ao DNA pela presença da histona γH2AX. Todos os genes avaliados foram expressos,
porém a RI provocou uma alteração na abundância de mRNA em apenas três: RAD52, BAX e
CCND2. Concluímos que as doses de radiação avaliadas não afetaram a evolução do processo de
maturação em oócitos bovinos obtidos de folículos antrais. Entretanto, os efeitos da RI em folículos
pré-antrais permanece desconhecido.
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