dc.creator | Bonez, Pauline Cordenonsi | |
dc.date.accessioned | 2019-10-22T19:24:26Z | |
dc.date.available | 2019-10-22T19:24:26Z | |
dc.date.issued | 2017-08-25 | |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufsm.br/handle/1/18647 | |
dc.description.abstract | Biofilm formation causes great public health concern due to the low response to antimicrobial
treatments and the colonization of surfaces such as prostheses and catheters. Pathogenic
microorganisms such as Pseudomonas aeruginosa are able to form biofilms in medical
devices and living tissues, can cause severe chronic infections in humans. Thus, it is
important to search effective alternatives against the formation of biofilms. A22 inhibits MreB
protein from the bacterial cytoskeleton altering the microbial cells shape, which can affect
many properties, including motility and biofilm formation. In this context, this work aimed to
evaluate, for the first time, the antibiofilm action of A22 on P. aeruginosa, as well as their
potencial cyto and genotoxic effects. The antibacterial activity of A22 was evaluated by
conventional methods on standard strains and 28 multiresistant clinical isolates of P.
aeruginosa. The cyto and genotoxicity tests were performed by MTT test and Comet assay,
respectively. The adhesion capacity of clinical isolates and standard strain was measured in
polyestyrebe plates. Essential factors to the biofilm physiology of P. aeruginosa, such as
swimming, swarming ant twitching motility, as well as adhesion to HeLa cells and adhesion to
High Density Polyethylene (HDPE) were evaluated in the presence and absence of A22.
Atomic Force Microscopy (AFM) was used to visualize adhesion on HDPE substrate. This
study confirmed the excellent antimicrobial activity of A22, especially in relation to
multiresistant isolates. Likewise, A22 showed no cytotoxic effects on human Peripheral
Blood Mononuclear Cells (PBMCs) at all exposure times, with exception of concentration of
the 32μg/mL, and did not demonstrate genotoxic effects on the cells after 24 and 48 hours. In
addition, the results showed a high adhesion pattern in 14 multiresistant clinical isolates, with
inhibiting the adhesion of 9 of these microorganisms. A22 was able to decrease adhesion and
biofilm formation of the P. aeruginosa PAO1 on polyestyrene plates, HeLa cells and HDPE.
Moreover, the swarming and twitching motilities were significantly decreased by A22 in
subinhibitory concentrations. The impact and scientific contribution of this work are based on
the discovery of a potencial new therapeutic possibility against infections associated with
biofilms of P. aeruginosa. The A22 presents as an useful and promising tool to decrease
microbial adhesion in both living and inert surfaces, given its low toxic effects. However, this
thesis results stimulate the deepening in methodologies that aim the insertion of A22 as a new
antibacterial or coating agent on medical materials. | eng |
dc.description.sponsorship | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES | por |
dc.language | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de Santa Maria | por |
dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | * |
dc.subject | A22 | por |
dc.subject | Pseudomonas aeruginosa | por |
dc.subject | Motilidade | por |
dc.subject | PEAD | por |
dc.subject | Células HeLa | por |
dc.subject | Adesão bacteriana | por |
dc.subject | Biofilmes | por |
dc.subject | Motility | eng |
dc.subject | HDPE | eng |
dc.subject | HeLa cells | eng |
dc.subject | Bacterial adhesion | eng |
dc.subject | Biofilms | eng |
dc.title | Atividade antimicrobiana, antibiofilme, cito e genotóxica do S- (3,4-diclorobenzil) isotioureia (A22) | por |
dc.title.alternative | Antimicrobial, antibiofilm, cito and genotoxic activities of S- (3,4-dichlorobenzyl) isotioureia (A22) | eng |
dc.type | Tese | por |
dc.description.resumo | A formação de biofilmes causa grande preocupação para a saúde pública devido à baixa
resposta aos tratamentos antimicrobianos e à colonização de superfícies como próteses e
cateteres. Microrganismos patogênicos como Pseudomonas aeruginosa são capazes de formar
biofilmes em dispositivos médico-hospitalares e tecidos vivos, podendo causar infecções
crônicas graves em humanos. Deste modo, torna-se importante buscar alternativas eficazes
contra a formação de biofilmes. O A22 inibe a proteína MreB do citoesqueleto bacteriano
alterando o formato das células microbianas, o que pode afetar muitas propriedades, incluindo
a motilidade e a formação de biofilmes. Neste contexto, este trabalho teve como objetivo
avaliar, pela primeira vez, a ação antibiofilme do A22 sobre isolados de P. aeruginosa, bem
como os seus potenciais efeitos cito e genotóxicos. A atividade antibacteriana do A22 foi
avaliada por métodos convencionais sobre cepas padrões e 28 isolados clínicos
multirresistentes de P. aeruginosa. Os ensaios de cito e genotoxicidade foram realizados pelo
teste do MTT e ensaio do Cometa, respectivamente. A capacidade de adesão dos isolados
clínicos e da cepa padrão foi avaliada em placas de poliestireno. Fatores essenciais à fisiologia
do biofilme de P. aeruginosa PAO1, como as motilidades dos tipos swimming, swarming e
twitching, bem como a adesão às células HeLa e adesão a superfície de Polietileno de Alta
Densidade (PEAD) foram avaliados na presença e na ausência do A22. A Microscopia de
Força Atômica (MFA) foi utilizada para visualizar a adesão em PEAD. Este estudo ratificou a
excelente atividade antimicrobiana do A22, principalmente em relação aos isolados
multirresistentes. Da mesma forma, o A22 não apresentou efeitos citotóxicos sobre células
mononucleares de sangue periférico humano em todos os tempos de exposição avaliados,
exceto na concentração de 32μg/mL, e não demonstrou efeitos genotóxicos sobre as células
após 24 e 48 horas. Os resultados mostraram um alto padrão de adesão em 14 isolados
clínicos multiresistentes, sendo que o A22 inibiu a adesão de 9 destes microrganismos. O A22
conseguiu reduzir a adesão e formação de biofilmes da cepa P. aeruginosa PAO1 em placas
de poliestireno, nas células HeLa e no PEAD. Do mesmo modo, as motilidades swarming e
twitching foram significativamente diminuídas pela ação do A22 em concentrações
subinibitórias. O impacto e contribuição científica deste trabalho estão alicerçados na
descoberta de uma potential nova possibilidade terapêutica contra infecções associadas a
biofilmes de P. aeruginosa. O A22 apresentou-se como uma ferramenta útil e promissora para
reduzir a adesão microbiana tanto em superfícies vivas quanto inertes, haja vista os seus
baixos efeitos tóxicos. Os resultados desta tese estimulam o aprofundamento em metodologias
que visem a inserção do A22 como um novo antibacteriano ou agente de revestimento de
materiais médico-hospitalares. | por |
dc.contributor.advisor1 | Campos, Marli Matiko Anraku de | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/6421182991125434 | por |
dc.contributor.advisor-co1 | Santos, Roberto Christ Vianna | |
dc.contributor.advisor-co1Lattes | http://lattes.cnpq.br/9176719594431835 | por |
dc.contributor.referee1 | Botton, Sônia de Avila | |
dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/0814772095155945 | por |
dc.contributor.referee2 | Alves, Sydney Hartz | |
dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/0330782478769631 | por |
dc.contributor.referee3 | Bitencourt, Paula Eliete Rodrigues | |
dc.contributor.referee3Lattes | http://lattes.cnpq.br/8565433192385651 | por |
dc.contributor.referee4 | Zanette, Régis Adriel | |
dc.contributor.referee4Lattes | http://lattes.cnpq.br/3166371422900794 | por |
dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/5442731606336558 | por |
dc.publisher.country | Brasil | por |
dc.publisher.department | Farmacologia | por |
dc.publisher.initials | UFSM | por |
dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas | por |
dc.subject.cnpq | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA | por |
dc.publisher.unidade | Centro de Ciências da Saúde | por |