Uso do modelo celular tridimensional de adenocarcinoma de câncer de pulmão na triagem de compostos organocalcogênios
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2019-09-04Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
O adenocarcinoma pulmonar é uma das principais causas de morte no mundo associadas ao câncer, mas a erradicação ou controle dessa doença está longe de ser realidade. O tratamento com quimioterápicos como a cisplatina vem apresentando sucesso, levando ao aumento da sobrevida de alguns pacientes. Seu modo de ação ocorre através da ligação direta ao DNA impedindo a replicação, levando a morte celular. Porém, o desenvolvimento de resistência à cisplatina representa um sério problema clínico. Estudos com foco em novas moléculas mais efetivas no tratamento do câncer vêm ganhando notoriedade, como as propriedades antitumorais dos compostos organocalcogênios que são utilizados em sínteses orgânicas. A identificação de compostos com potencial terapêutico normalmente é iniciada no cultivo celular, pois permite o estudo de células humanas em um número maior de combinações, com diferentes parâmetros. Apesar disso, a cultura de células em monocamada (2D) não reproduz a complexidade espacial das células neoplásicas, assim, não permite as mesmas interações entre os ambientes celular e extracelular, por exemplo. Assim, há um grande interesse em modelos celulares que reproduzam características in vitro fisiopatológicas mais acuradas encontradas in vivo, como, o cultivo tridimensional. Culturas tridimensionais (esferoides) permitem que as células realizem interações célula-célula ou célula-matriz. Essas interações levam ao aumento da diferenciação celular, ativam a sinalização celular devido a componentes da matriz extracelular, modificam o padrão de expressão gênica previamente observado em cultura 2D e alteram a expressão de moléculas envolvidas na adesão de matriz e célula-célula. Na cultura tridimensional as células estão dispostas em várias camadas conferindo uma barreira biológica à difusão de fármacos, que terão que se difundir entre essas camadas, semelhante ao que ocorre in vivo. No câncer, essa cultura tem sido amplamente utilizada, por exemplo, em pesquisas que testam a eficiência de medicamentos. Dessa maneira o objetivo geral deste trabalho foi a padronização do modelo de cultivo celular tridimensional, na linhagem de adenocarcinoma de pulmão A549, e utilizar esse modelo no rastreio de moléculas com potencial antitumoral. Primeiramente foram testados protocolos que utilizaram ou matrigel ou gel de agarose para a formação dos esferoides. Após a padronização, os parâmetros morfométricos foram avaliados por análise de imagem e a área quantificada. Adicionalmente, os esferoides foram tratados com nove compostos organocalcogênios e comparados com o quimioterápico cisplatina, a citotoxicidade foi avaliada pelo ensaio de mtt, todos os compostos e a cisplatina foram diluídos em DMSO. Neste estudo, tornamos confiável a formação dos esferoides usando uma linhagem celular de adenocarcinoma humano A549 somente no protocolo de gel de agarose testado.Todos os compostos e a cisplatina diminuíram significativamente a viabilidade celular quando comparados com o grupo controle após 48 horas. O composto 3 apresentou o menor valor de IC50 entre todos os compostos testados após 48h de exposição. Considerando os dados aqui apresentados, demonstramos que um modelo tridimensional de adenocarcinoma é adequado para o rastreio de possíveis agentes antitumorais.
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