Transporte de oócitos bovinos em meio de maturação sem controle de atmosfera gasosa
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Data
2002-02-01Primeiro membro da banca
Rubin, Mara Iolanda Batistella
Segundo membro da banca
Mezzalira, Alceu
Metadata
Mostrar registro completoResumo
Dois experimentos foram delineados para avaliar o efeito do transporte simulado de oócitos para a produção de embriões bovinos. Complexos cumulus-oócitos (CCO’s, n=1586) obtidos de ovários de matadouro foram submetidos ao transporte simulado em meio de MIV TCM+HEPES por diferentes períodos. No Experimento I (7 repetições), a MIV dos oócitos, efetuada em TCM 199, em estufa com 5% de CO2 em ar, durante 24h (grupo Controle, n=208), foi comparada à MIV em TCM+HEPES, em banho-maria a 39ºC, durante 6h, seguida de MIV complementar por 18h, como no grupo Controle. No experimento II (11 repetições), os oócitos foram distribuídos aleatoriamente em 4 tratamentos. No grupo Controle, os oócitos (n=296) foram maturados por 24h em TCM-199 modificado, acrescido de HEPES, rFHS-h, Soro de Vaca em Estro em Estro (SVE) e piruvato, em estufa a 39ºC, com 5% de CO2 em ar e umidade saturada. Os oócitos submetidos ao transporte simulado, permaneceram por 6 (T6, n=286), 12 (T12, n=294) e 18h (T18, n=301) em meio de MIV TCM+HEPES, em banho-maria a 39ºC, com os mesmos componentes usados no grupo Controle, exceto o bicarbonato. Encerrado cada um dos períodos de transporte, os oócitos foram transferidos para placas com meio de MIV até completarem 24h em estufa. Nos experimentos I e II, após a maturação, os oócitos foram fecundados em FERT-TALP com heparina e espermatozóides (1 x 106/mL) selecionados por migração ascendente. Os possíveis zigotos foram cultivados em SOF por 8 dias. No experimento I, as taxas de clivagem e de blastocistos em D7 e D9 foram similares. No experimento II, as taxas de desenvolvimento embrionário em D7 foram semelhantes para o grupo controle, T6 e T12, com uma redução observada no grupo T18 quando comparada aos grupo Controle e T12 (P<0,05). Em D9, houve uma produção mais baixa de blastocistos expandidos mais eclodidos no grupo T18 (P<0,05), mas não houve diferença na taxa de eclosão. O numero médio de células dos blastocistos eclodidos foi semelhante nos grupos Controle (136), T6 (125,5) e T12 (126,8). Esses resultados indicam a possibilidade de transportar oócitos bovinos em meio de MIV TCM+HEPES, sem controle de atmosfera gasosa, a 39ºC, por até 12h. Esta técnica oferece uma alternativa prática e eficiente para o transporte de oócitos bovinos para a PIV.
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