Perfil eletroforético das proteínas do plasma seminal de reprodutores taurinos e zebuínos de alta congelabilidade do sêmen
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Data
2001-12-07Primeiro coorientador
Souza, Diogo Onofre
Segundo coorientador
Rubin, Mara Iolanda Batistella
Primeiro membro da banca
Salbego, Christianne Gazzana
Segundo membro da banca
Brass, Karin Érica
Metadata
Mostrar registro completoResumo
A análise das proteínas do plasma seminal de 14 reprodutores, 7 taurinos e 7 zebuínos, doadores de sêmen de uma Central de Inseminação e considerados de alta congelabilidade do sêmen foi realizada através de eletroforese bidimensional, pela técnica de O’Farrel et al., (1977), modificada por Rodnight et al., (1988). Onze bandas protéicas de baixo peso molecular (10-24 kDa) foram analisadas em géis de acrilamida a 15%, corados por Azul de Comassie e quantificadas de acordo com a densidade óptica exibida. As bandas avaliadas não apresentaram mesma freqüência de aparecimento nas espécies. Em reprodutores taurinos, com exceção das bandas 13 (14-15 kDa) e 19 (16-18 kDa), presentes nas amostras de 28,60% (2/7) dos reprodutores, as demais proteínas estiveram presentes nas amostras de plasma seminal de 100% dos animais. Apenas as bandas 3 (15-16 kDa), 5 (16-17 kDa), 7 (11-12 kDa) e 9 (14-15 kDa) não apresentaram variações significativas entre as amostras dos reprodutores. Em zebuínos, as bandas protéicas 11 (13-14 kDa), 19 (16-18 kDa,) e 23 (20-22 kDa) foram evidenciadas nas amostras de 71% ( 5/7) dos reprodutores, a banda 13 em 57% (4/7) e as demais bandas estiveram presentes nas amostras de 100% dos animais. Com exceção da banda 15 (11-12 kDa), as demais diferiram significativamente entre as amostras dos touros. Cinco bandas diferiram estatisticamente entre as espécies (P<0,05), as bandas 5 (16-17 kDa), 7 (11-12 kDa), 15 (11-12, kDa), 21 (20-24 kDa) e 23 (20-22 kDa), sendo que os reprodutores taurinos apresentaram densidades ópticas superiores nas bandas protéicas 7 e 23 e os zebuínos nas bandas 5; 15 e 21. As bandas 7 e 23 foram identificadas como aSFP e clusterina, através de seqüenciamento protéico. As proteínas de alto peso molecular (acima de 45 kDa) foram analisadas em géis de poliacrilamida a 8%, sendo quantificadas três bandas protéicas de pesos moleculares de 195; 66 e 55 kDa, presentes em 100% das amostras de plasma seminal. Nas amostras de taurinos, as densidades ópticas da banda de 55 kDa, que foi imunoidentificada como osteopontina, foram significativamente superiores (P<0,05) às dos zebuínos e as demais bandas não apresentaram variações significativas entre as espécies. A banda protéica de 66 kDa foi imunoidentificada como albumina. Nas amostras de taurinos, as densidades ópticas das bandas protéicas não evidenciaram variação significativa entre os animais, entretanto, nas de zebuínos, as densidades ópticas da albumina apresentaram diferenças significativas.
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