Estudo in silico e in vitro da curcumina livre e nanoestruturada em células infectadas e não infectadas por Toxoplasma gondii
Fecha
2024-02-05Primeiro coorientador
Chitolina, Maria Rosa
Segundo coorientador
Bottari, Nathieli Bianchin
Primeiro membro da banca
Oliveira, Camila Belmonte
Segundo membro da banca
Barbisan, Fernanda
Terceiro membro da banca
Cadoná, Francine Carla
Quarto membro da banca
Baldissera, Matheus Dellaméa
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
A toxoplasmose, doença causada pelo protozoário intracelular Toxoplasma gondii (T. gondii)
afeta diversos órgãos, dentre eles, o sistema nervoso central (SNC). A baixa eficácia terapêutica
está relacionada à passagem pela barreira hematoencefálica (BHE), a forma latente do parasito,
bem como os efeitos colaterais dos medicamentos convencionais. Sistemas nanoestruturados
podem entregar ativamente substâncias ao SNC e melhorar a eficácia e a biodisponibilidade
terapêutica de substâncias como a curcumina. Esse polifenol possui capacidade antiinflamatória e propriedades antioxidantes que podem mediar as alterações inflamatórias
causadas pela infecção por T. gondii. No entanto, sua eficácia é limitada devido à baixa
solubilidade em água e biodistribuição e instabilidade em pH específicos que podem ser
contornados com o uso da nanotecnologia. As nanocápsulas de curcumina podem atuar na
resposta imunológica, modulando vias de sinalização inflamatórias, antioxidantes e neuronais.
Com isso, objetivou-se investigar a farmacocinética e toxicidade da curcumina in silico, bem
como a influência do tratamento com curcumina livre e de diferentes sistemas nanoestruturados
nos mecanismos moleculares de sinalização em células expostas e não expostas à infecção com
T. gondii in vitro. O perfil ADME/Tox de curcumina foi gerado utilizando ferramentas
computacionais. As nanocápsulas de Eudragit® L-100 e PCL foram produzidas e caracterizadas
e após avaliou-se o potencial hemolítico em eritrócitos, bem como a capacidade citotóxica
(ensaio MTT e dsDNA PicoGreen®
) e influência no metabolismo redox (produção de óxido
nítrico e DCF) em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) e fibroblastos
(linhagem celular HFF-1). Ainda, os testes in vitro de citotoxicidade, metabolismo redox e
expressão gênica (IL-10, IL-1β, TNF-α, NRLP3, P2X7, A1 e A2A) foram realizados para células
microgliais (linhagem celular BV-2) infectadas com T. gondii. Os resultados computacionais
para a curcumina mostraram baixa biodistribuição, ausência de permeação da BHE, absorção
gastrointestinal discreta, potencial inibidor das isoformas do citocromo P450 (CYP2C9 e
CYP3A4), classe de toxicidade IV e ação imunomoduladora. Nos testes in vitro os tratamentos
induzem diferentes respostas celulares de acordo com os tipos de células utilizadas, CMSP
apresentaram um padrão dependente da concentração, enquanto as células HFF-1 o tempo de
incubação era uma variável importante. As interações redox mostraram que as nanocápsulas
induziram a produção de óxido nítrico e todos os tratamentos reduziram os níveis de espécies
reativas. As células microgliais infectadas com T. gondii mostraram um efeito citotóxico da
curcumina, a qual modulou as vias inflamatórias, oxidantes e purinérgicas através da
sinalização celular em resposta a marcadores pró e anti-inflamatórios. Além disso, os sistemas
nanoestruturados aumentaram os padrões de resposta à sinalização celular quando comparados
à substância na forma livre. Em geral, os tratamentos modularam positivamente a resposta
imune e a sinalização celular mediada por purinas, interferindo na infecção por T. gondii.
Destaca-se que a segurança farmacológica deve sempre ser avaliada para sistemas de liberação,
principalmente, substâncias com múltiplas vias de interação. Ainda, sistemas nanoestruturados apresentaram melhor resposta de tratamento do que a substância na forma livre. Com isso,
modelos de entrega nanoestruturados auxiliam para que as propriedades terapêuticas possam
ser melhor aproveitadas especialmente em doenças neuroinflamatórias.
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