Moraxella bovis, Moraxella ovis e Moraxella bovoculi: formação de biofilme e atividade de lisozima
Abstract
Ceratoconjuntivite infecciosa (CI) é a enfermidade ocular mais importante em bovinos e ovinos. A doença representa significativas perdas econômicas em rebanhos no mundo inteiro, em decorrência de sua característica altamente contagiosa. O agente etiológico primário desta enfermidade é Moraxella bovis, porém M. bovoculi e M. ovis também têm sido recuperados de animais com a doença. A CI é documentada como sendo uma doença de portador, e esses animais possuem um papel fundamental na manutenção do micro-organismo em um rebanho. Todavia, ainda, não estão claros, quais fatores estão relacionados a capacidade de Moraxella spp. sobreviver na conjuntiva e na mucosa nasal de animais sem promover doença, bem como permanecer viável mesmo após o tratamento com dosagens elevadas de antimicrobianos. No presente estudo, abordou-se a formação de biofilme em M. bovis, M. bovoculi e M. ovis como fator associado à manutenção de animais na forma de portador. Adicionalmente, pesquisou-se a resistência de Moraxella spp. à lisozima, importante enzima antibacteriana, presente na lágrima e que atua como primeira linha de defesa a invasão da córnea por micro- organismos. A resistência dos micro-organismos frente à lisozima está associada à capacidade de conseguir aderir à córnea e promover a infecção. Nesta pesquisa, foi possível evidenciar que todos os isolados de M. bovis (15/54), M. ovis (21/54) e M. bovoculi (18/54) testados (54/54) foram capazes de formar biofilme e foram classificados quanto à intensidade de formação de biofilme. A concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração bactericida mínima (CBM) da lisozima foram determinadas para 33 isolados das três espécies de Moraxella em células planctônicas. Verificou-se que CIM e CBM foram bastante variáveis intraespécies, de 79,12 μg ml-1 até valores superiores à 1266 μg ml-1, não havendo diferença estatística na susceptibilidade à lisozima entre Moraxella spp. No entanto, quando testada em formas sésseis, a lisozima não apresentou capacidade de erradicar os biofilmes, porém promoveu uma redução na produção destes e nos biofilmes consolidados não houve diminuição após o acréscimo da lisozima, demonstrando não haver ação desta enzima em biofilmes previamente estabelecidos. Com os resultados obtidos neste estudo, é possível inferir que a capacidade de formação de biofilmes por M. bovis, M. ovis e M. bovoculi e a resistência às concentrações de lisozima, iguais ou superiores aos níveis fisiológicos da lágrima de bovinos e ovinos, pode estar ligada não apenas à capacidade de colonizar a conjuntiva, mas, também, permanecer neste local mesmo após a cura das lesões, na condição de indivíduo portador e servindo como um reservatório do agente etiológico da doença em um rebanho.
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