Avaliação histológica,histoquímica e imuno-histoquímica de mastocitomas cutâneos em cães
Resumo
O mastocitoma é o tumor mesenquimal cutâneo mais prevalente do cão. Na região de
Santa Maria, RS, este neoplasma corresponde a 20% dos tumores malignos de pele
diagnosticados na rotina laboratorial. O diagnóstico clínico-patológico pode ser realizado
através da citologia, exame histopatológico e imuno-histoquímico. A técnica de imunohistoquímica
é empregada para diferenciar tumores biologicamente mais agressivos de
tumores menos agressivos. Entretanto, alguns dos imunomarcadores atualmente
disponíveis sofrem influência pela fixação em formol, interferindo nos resultados. O
principal objetivo deste estudo foi avaliar em mastocitomas cutâneos caninos a
interferência do formol na imunomarcação para a proteína KIT e a proteína Ki67 em
quatro tempos de fixação pré-estabelecidos (24, 48, 72 e 96h). Foram utilizados ainda,
dois sistemas de amplificação para determinar possíveis diferenças na detecção para
cada um dos dois anticorpos estudados. Este estudo foi dividido em duas partes: um
estudo retrospectivo, analisando amostras de tecidos de 25 casos de biópsias sem
conhecimento do tempo de fixação; e um estudo prospectivo, analisando amostras de
tecidos de 12 casos com tempos de fixação conhecidos. Em ambos os estudos foram
aplicados dois sistemas de graduação histológica (Patnaik e Kiupel), a coloração especial
de Azul de Toluidina e a imuno-histoquímica para as proteínas KIT e Ki67.
Adicionalmente, no estudo prospectivo, foram testados dois sistemas de amplificação
para a proteína Ki67 (biotinilado e não biotinilado) e a técnica de AgNOR (contagem das
regiões organizadoras nucleolares argirofílicas). Foi observado que a fixação por até 96h
não interferiu na avaliação imuno-histoquímica para a proteína KIT. Porém, para a
proteína Ki67, houve marcada interferência quando a fixação foi superior a 24h. Ambos os
sistemas de amplificação utilizados mostraram resultados satisfatórios. Porém, não houve
diferenças e/ou melhora nos resultados da imunomarcação para o Ki67, quando
comparados os dois sistemas de amplificação. A utilização adicional do método
histoquímico de AgNOR, para avaliar a taxa de proliferação celular, é sugerida quando o
tempo de fixação do neoplasma for desconhecido ou superior a 24h.
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