dc.creator | Rissi, Vitor Braga | |
dc.date.accessioned | 2019-04-24T16:23:30Z | |
dc.date.available | 2019-04-24T16:23:30Z | |
dc.date.issued | 2019-02-13 | |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufsm.br/handle/1/16305 | |
dc.description.abstract | Recent studies highlight the role of epigenetic changes during reproductive events, from the
formation of gametes to fertilization and early embryo development. In these processes, a dynamic
epigenetic regulation is observed and is thought to be determinant for the subsequent development.
Recent studies have identified several molecules and genes that catalyze the addition and removal
of epigenetic modifications in an active way. Therefore, in the first study, several genes coding for
histone demethylases were characterized during initial embryo development in bovine and porcine
species. Embryos produced by in vitro fertilization and somatic cell nuclear transfer were used. A
significant increase in the expression of several demethylases during embryo genome activation
period was observed in both species. In addition, the expression of such genes was altered in
embryos produced by nuclear transfer. The obtained results have identified that histone
demethylase enzymes may have an important role during early embryo development. Moreover,
the aberrant expression of such genes may be related to an incomplete cellular reprogramming in
cloned embryos. In a second study, the effect of the association between a deacetylase inhibitor, a
molecule that promotes histone acetylation, and an inhibitor of transcriptional activity on
embryonic development in cloned embryos was evaluated. The treatment was able to improve
embryo development. In addition, the expression of several histone demethylases previously
characterized in the first study was assessed. The treatments were able to modulate the expression
of some histone demethylases, showing a pattern of expression similar to fertilized embryos. In the
final study, a functional assessment was performed with a lysine demethylase that was previously
showed to have a peak of expression during genome activation in bovine and porcine species.
Knockdown of KDM7A gene expression was performed by interference RNA microinjection. The
knockdown effect resulted in impaired embryo development, altered levels of histone methylation
and affected the expression of key pluripotency genes. Altogether, data presented in these studies
provided evidence that epigenetic modulators, such as, lysine demethylases play important roles
on embryo development and cell reprogramming in cloned embryos. | eng |
dc.description.sponsorship | Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES | por |
dc.language | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de Santa Maria | por |
dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | * |
dc.subject | Bovino | por |
dc.subject | Suíno | por |
dc.subject | Reprogramação celular | por |
dc.subject | Epigenética | por |
dc.subject | Embrião | por |
dc.subject | Bovine | eng |
dc.subject | Swine | eng |
dc.subject | Cellular reprogramming | eng |
dc.subject | Epigenetics | eng |
dc.subject | Embryo | eng |
dc.title | Regulação epigenética no desenvolvimento embrionário inicial e reprogramação celular na clonagem por transferência nuclear | por |
dc.title.alternative | Epigenetic regulation in the early embryo development and cell reprogramming by nuclear transfer | eng |
dc.type | Tese | por |
dc.description.resumo | Estudos recentes têm destacado o papel das modificações epigenéticas durante os processos
reprodutivos, desde a formação dos gametas até a fecundação e desenvolvimento embrionário
inicial. Nesse período, uma ativa regulação de inúmeros fatores epigenéticos são determinantes
para o desenvolvimento embrionário subsequente. Nos últimos anos, foram descritas diversas
moléculas e genes capazes de alterar e/ou sofrer modificações epigenéticas de maneira ativa. Desta
forma, nesta tese, em um primeiro estudo, foi realizada uma caracterização de genes que codificam
demetilases de histonas durante o desenvolvimento embrionário inicial nas espécies bovina e suína.
Foram utilizados embriões produzidos por fecundação in vitro e clonagem por transferência nuclear
de células somáticas. Um aumento significativo na expressão de diversas demetilases no período
correspondente a ativação do genoma embrionário em ambas espécies foi observada. Além disso,
embriões produzidos por transferência nuclear apresentaram uma expressão atípica desses mesmos
genes em comparação a embriões fecundados. Os resultados obtidos nesse primeiro trabalho nos
permitiram identificar a importância das enzimas demetilases de histonas para o desenvolvimento
embrionário inicial. Por outro lado, a expressão errônea de tais genes evidencia uma incompleta
reprogramação celular em embriões clonados. Em um segundo estudo, foi avaliado o efeito da
associação entre um inibidor de deacetilases, molécula que promove a acetilação das histonas, e
um inibidor de atividade transcricional sobre o desenvolvimento embrionário em embriões
clonados. A associação foi capaz de melhorar o desenvolvimento e a qualidade dos embriões
produzidos. Além disso, foi avaliada a expressão das principais demetilases de histonas
previamente caracterizadas no primeiro estudo. Os tratamentos foram capazes de modular a
expressão de algumas demetilases de histonas, refletindo um padrão de expressão, aproximandose
aos padrões observados em embriões fecundados. No terceiro trabalho, foi realizado um estudo
funcional de uma demetilase que demonstrou um pico de expressão durante a ativação do genoma
em bovinos e suínos. Foi realizado o knockdown da expressão através da injeção de RNA de
interferência e avaliado o seu efeito sobre o desenvolvimento embrionário. O knockdown reduziu
as taxas de desenvolvimento embrionário, alterou o padrão de metilação de histonas, reduziu a
qualidade, bem como a expressão de genes de pluripotência nos embriões. Em conjunto, os dados
apresentados evidenciam a importância de moduladores epigenéticos tanto para o desenvolvimento
embrionário inicial quanto para a reprogramação celular em embriões clonados. | por |
dc.contributor.advisor1 | Gonçalves, Paulo Bayard Dias | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/5837260966665885 | por |
dc.contributor.referee1 | Bordignon, Vilceu | |
dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/4122176682347906 | por |
dc.contributor.referee2 | Barreta, Marcos Henrique | |
dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/5885484214886762 | por |
dc.contributor.referee3 | Portela Junior, Valério Valdetar Marques | |
dc.contributor.referee3Lattes | http://lattes.cnpq.br/0564876468635367 | por |
dc.contributor.referee4 | Glanzner, Werner Giehl | |
dc.contributor.referee4Lattes | http://lattes.cnpq.br/4732521669621196 | por |
dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/3388550039533131 | por |
dc.publisher.country | Brasil | por |
dc.publisher.department | Medicina Veterinária | por |
dc.publisher.initials | UFSM | por |
dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Medicina Veterinária | por |
dc.subject.cnpq | CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::MEDICINA VETERINARIA | por |
dc.publisher.unidade | Centro de Ciências Rurais | por |