dc.creator | Rovani, Bruno Tomazele | |
dc.date.accessioned | 2019-07-01T22:05:28Z | |
dc.date.available | 2019-07-01T22:05:28Z | |
dc.date.issued | 2015-08-21 | |
dc.identifier.uri | http://repositorio.ufsm.br/handle/1/17245 | |
dc.description.abstract | The medical application of ionizing radiation in radiotherapy has been crucial in the treatment
of cancer due to its harmful action tumor cells, by direct interaction with DNA molecules or indirectly
with the H2O molecules (radiolysis, producing Free Radicals and Reactive Oxygen Species). Both
interactions may cause genetic mutations in DNA breakage and physical structure, inducing cell death.
However, as a result of radiotherapy, damage to the healthy cells can occur. Women treated with
irradiation abdominal, pelvic or total body irradiation, may present permanent damage and loss of
ovarian primordial follicles, resulting in uterine dysfunction, premature menopause, miscarriage and
infertility. In order to investigate the possible damage and consequences to the healthy cells generated
by radiotherapy, in this study bovine ovaries were irradiated, which are considered a good model to
study reproductive events in women. In a first experiment, after irradiation of the ovaries (dose 0,9Gy,
1,8Gy, and 3,6Gy 18,6Gy), oocytes were selected and grown for 24 hours at which time analysis of
nuclear maturation were conducted. In a second experiment, after irradiation of the ovaries (1,8Gy and
18,6Gy), oocytes were selected and cultivated for 1h, at which time we assessed the frequency of
DNA damage by Immunofluorescence detection of phosphorylated histone H2AX (γH2AX). At the
same time (1h) cumulus cells were separated for expression analysis of genes involved in DNA repair
mechanisms (53BP1, RAD52, ATM, Ku70 and Ku80), apoptosis (BAX) and cell cycle control
(CCND2) through RNA extraction and qRT-PCR. Results showed that radiation doses tested did not
affect the nuclear maturation rate and it was not possible to detect DNA damage by the presence
histone γH2AX. All analyzed genes were expressed but IR only altered the mRNA abundance of:
RAD52, BAX and CCND2. We conclude that the assessed radiation doses did not affect the evolution
of the maturation process in oocytes obtained from antral follicles. However, the effects of IR in
preantral follicles remains unknown. | eng |
dc.language | por | por |
dc.publisher | Universidade Federal de Santa Maria | por |
dc.rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International | * |
dc.rights.uri | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ | * |
dc.subject | Radiação ionizante | por |
dc.subject | Infertilidade | por |
dc.subject | Modelo bovino | por |
dc.subject | Reparo do DNA | por |
dc.subject | qRT-PCR | por |
dc.subject | Ionizing radiation | eng |
dc.subject | Infertility | eng |
dc.subject | Bovine model | eng |
dc.subject | DNA repair | eng |
dc.title | Efeitos da radiação ionizante na maturação de oócitos bovinos: busca por modelos de estudo em radiobiologia | por |
dc.title.alternative | Effect of ionizing radiation on bovine oocyte maturation: searching for radiobiology models of study | eng |
dc.type | Dissertação | por |
dc.description.resumo | A aplicação médica da radiação ionizante (RI) na radioterapia tem sido crucial no tratamento
de diversos tipos de câncer devido a sua ação lesiva as células tumorais, decorrente da interação direta
com as moléculas de DNA ou indireta com as moléculas de H2O (radiólise, produzindo Espécies
Reativas do Oxigênio). Ambas as interações podem induzir mutações gênicas e quebras na estrutura
física do DNA, induzindo a morte celular. Entretanto, em decorrência do tratamento radioterápico,
também podem ocorrer danos as células saudáveis. Mulheres tratadas com irradiação abdominal,
pélvica ou irradiação total do corpo, podem apresentar danos permanentes ao ovário e perda dos
folículos primordiais, resultando em disfunção uterina, menopausa precoce, abortos espontâneos e
infertilidade. Visando investigar os possíveis danos as células saudáveis gerados no tratamento
radioterápico e suas consequências, neste estudo foram irradiados ovários bovinos, os quais
constituem um bom modelo de estudo para eventos reprodutivos na mulher. Em um primeiro
experimento, após a irradiação dos ovários (doses de 0,9 Gy, 1,8 Gy, 3,6 Gy e 18,6 Gy), oócitos foram
selecionados e cultivados por 24h, momento no qual foi efetuada análise da maturação nuclear. Em um
segundo experimento, após a irradiação dos ovários (1,8 Gy e 18,6 Gy), oócitos foram selecionados e
cultivados por 1h, momento no qual avaliou-se a frequência de danos no DNA por meio da detecção
de imunofluorescência da histona H2AX fosforilada (γH2AX). No mesmo momento (1h), células do
cumulus foram separadas para análise da expressão de genes envolvidos nos mecanismos de reparo do
DNA (53BP1, RAD52, ATM, Ku70 e Ku80), apoptose (BAX) e controle do ciclo celular (CCND2)
através das técnicas de extração de RNA e qRT-PCR. Os resultados mostraram que as doses de
radiação testadas não afetam a taxa de maturação nuclear dos oócitos, sendo que não foi possível
detectar danos ao DNA pela presença da histona γH2AX. Todos os genes avaliados foram expressos,
porém a RI provocou uma alteração na abundância de mRNA em apenas três: RAD52, BAX e
CCND2. Concluímos que as doses de radiação avaliadas não afetaram a evolução do processo de
maturação em oócitos bovinos obtidos de folículos antrais. Entretanto, os efeitos da RI em folículos
pré-antrais permanece desconhecido. | por |
dc.contributor.advisor1 | Bauermann, Liliane de Freitas | |
dc.contributor.advisor1Lattes | http://lattes.cnpq.br/5849925846135968 | por |
dc.contributor.referee1 | Cruz, Ivana Beatrice Mânica Da | |
dc.contributor.referee1Lattes | http://lattes.cnpq.br/3426369324110716 | por |
dc.contributor.referee2 | Lopes, Gilberti Helena Hübscher | |
dc.contributor.referee2Lattes | http://lattes.cnpq.br/1172295109796807 | por |
dc.creator.Lattes | http://lattes.cnpq.br/3871722477613125 | por |
dc.publisher.country | Brasil | por |
dc.publisher.department | Farmácia | por |
dc.publisher.initials | UFSM | por |
dc.publisher.program | Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas | por |
dc.subject.cnpq | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::FARMACIA | por |
dc.publisher.unidade | Centro de Ciências da Saúde | por |