A influência da associação do laser de baixa potência e do guaraná (Paullinia cupana kunth) nos marcadores oxidativos, inflamatórios, fatores de crescimento e na proliferação de fibroblastos in vitro
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Data
2018-08-10Primeiro membro da banca
Premaor, Melissa Orlandin
Segundo membro da banca
Kafkle, Jonatas Zeni
Metadata
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Introdução: O envelhecimento cutâneo em humanos é um processo complexo e pode ser induzido por fatores
intrínsecos e extrínsecos. As espécies reativas de oxigênio (EROs) são as principais responsáveis pelas alterações
na pele especialmente à nível dos fibroblastos. O acúmulo de EROs no organismo e a ineficiência das defesas
antioxidantes instauram o estresse oxidativo, condição capaz de gerar danos no lipídios e proteínas de membrana
e no ácido desoxirribonucleico (DNA) celular. Investigações prévias têm demonstrado que o guaraná (Paullinia
cupana var. sorbilis Mart Kunth) por sua ação antioxidante, anti-inflamatória pode ser capaz de reparar danos
celulares. Além disso, o tratamento eletroterápico com o laser de baixa potencia (LBP) destaca-se por apresentar
ação anti-inflamatória, cicatrizante e biomoduladora tecidual. A associação destas duas terapias pode ser
coadjuvante aos tratamentos tradicionais para reparar os danos celulares cutâneos, justificando a relevância desta
pesquisa, pois ainda não existem estudos prévios associando estas terapias. Objetivo: Avaliar o efeito in vitro do
LBP nos marcadores de senescência celular de fibroblastos humanos expostos ao H2O2 e na potencialização dos
efeitos citoprotetores associados ao guaraná. Métodos: este estudo foi realizado em cultura de células
comerciais fibroblastos humanos da Linhagem HFF-1. As células foram expostas previamente ao H2O2, por 2
horas e em seguida foram tratadas com LBP no comprimento de onda de 660nm e com guaraná, permanecendo
por 24 ou 72 horas em cultivo. As doses utilizadas nos tratamento com guaraná e LBP, foram definidas após
realização da curva de doses. Após a definição das doses foram realizados os tratamentos de guaraná e LBP
isoladamente e em associação e após 24 ou 72h, foram realizadas as análises dos marcadores oxidativos,
inflamatórios, apoptoticos e de proliferação celular, conforme protocolos previamente descritos na literatura.
Resultados: O primeiro experimento (manuscrito 1) determinou a curva de dose do LBP e do H2O2 e a interação
destes tratamentos. Foi possível verificar que a melhor dose de H2O2 para este estudo foi de 50µM e do LBP foi
de 4 J/cm2
. Nesta dose, a interação do LBP com as células expostas ao H2O2 mostrou que o LBP possui efeito
anti-inflamatório, anti apoptótico e favorecedor de proliferação celular. O segundo experimento (manuscrito 2)
estabeleceu a curva de dose do guaraná e o efeito do uso isolado e da associação do LBP ao guaraná na reversão
dos danos gerados pelo H2O2. Ficou evidente que ambos os tratamentos tem ação citoprotetora, porém com a
associação dos tratamentos demostrou-se resultados mais relevantes na proliferação celular pelo aumento
significativo de células na fase S e aumento da expressão de FGF-1 nos fibroblastos tratados. Conclusão: os
resultados deste estudo sugerem que o LBP é capaz de atuar positivamente nos marcadores de senescência de
fibroblastos e que a associação do LBP com guaraná intensificou os efeitos cito-funcionais em relação aos
tratamentos isolados, especialmente na proliferação celular.
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