Perfil eletroforético das proteínas do plasma seminal e sua relação com a congelabilidade do sêmen bovino
Visualizar/ Abrir
Data
2001-12-07Primeiro coorientador
Salbego, Christianne Gazzana
Primeiro membro da banca
Rubin, Mara Iolanda Batistella
Segundo membro da banca
Brass, Karin Érica
Metadata
Mostrar registro completoResumo
O objetivo do presente estudo foi relacionar o perfil eletroforético das proteínas do plasma
seminal bovino com a congelabilidade do sêmen. F oi utilizado o plasma seminal de 16 reprodutores
bovinos de alta e baixa congelabilidade de uma central de inseminação artificial. Foi utilizada a
eletroforese bidimensional em géis de poliacrilamida a 15% e 8%, respectivamente, para a análise
das proteína s de baixo e alto peso molecular. Foram encontradas 12 bandas protéicas nas amostras
de plasma seminal analisadas nos géis SDS PAGE a 15%, corados com azul de Comassie. Apenas 6
das 12 bandas foram detectadas em todos os ejaculados estudados, sendo que som ente as bandas
protéicas 3 (15 16 kDa), 5 (16 17 kDa) e 7 (10 12 kDa) não apresentaram variação significativa
entre as amostras de plasma seminal dos reprodutores. Das proteínas focalizadas neste estudo, 4
apresentaram se quantitativamente superiores (P 0, 005) nas amostras dos reprodutores pertencentes
ao grupo de alta congelabilidade, as bandas 3 (15 16 kDa), 7 (11 12 kDa), 11 (13 14 kDa,) e 23 (20
22 kDa), enquanto que a banda protéica 25 (25 26 kDa) mostrou se significativamente superior
(P 0,005) nos re produtores de baixa congelabilidade do sêmen. A seqüência do N terminal da banda
protéica 7 mostrou se idêntica à proteína ácida do fluido seminal bovino (aSFP). O resultado do
seqüenciamento, após digestão por tripsina, da proteína 23 mostrou similaridade estrutural com a
clusterina bovina. Nos géis SDS PAGE a 8%, foram analisadas somente as bandas protéicas
identificadas em 100% das amostras de plasma seminal. Foram quantificadas três bandas protéicas
que apresentaram diferentes pesos moleculares e pontos isoelétricos: 190 195 kDa, pI 6,5 7,5;
66 kDa, pI 5,4 e 55 kDa, pI 4,5. A banda de 66 kDa foi identificada através de imunodetecção
como sendo a albumina e a banda protéica de 55 kDa foi identificada como osteopontina. A albumina
e a osteopon tina apresentaram densidade óptica significativamente superior (P 0,005) nas amostras
dos reprodutores de alta congelabilidade do sêmen. As evidências encontradas neste estudo mostram
que existem diferenças no perfil protéico dos reprodutores com alta e ba ixa congelabilidade do
sêmen, sugerindo as proteínas ácida do fluido seminal bovino, clusterina, osteopontina, albumina e
as bandas protéicas 3 e 11 como possíveis marcadores da alta congelabilidade do sêmen e a proteína
25 como indicativo da baixa congela bilidade do sêmen.
Coleções
Os arquivos de licença a seguir estão associados a este item: