Efeito in vitro do haloperidol e risperidona na ativação inflamatória de macrófagos RAW 264.7
Fecha
2015-04-10Primeiro coorientador
Duarte, Marta Maria Medeiros Frescura
Primeiro membro da banca
Bauermann, Liliane
Segundo membro da banca
Montano, Marco Aurélio Echart
Metadatos
Mostrar el registro completo del ítemResumen
Introdução: Fármacos antipsicóticos, como o haloperidol (típico) e a risperidona (atípico)
quando utilizados por muito tempo podem aumentar o risco de obesidade e de outras
disfunções endócrinas em pacientes psiquiátricos. Existem algumas evidências que sugerem
que estes fármacos possuem efeito pró-inflamatório, o que contribuiria para o estabelecimento
destes distúrbios. Entretanto, os resultados obtidos até o presente momento são bastante
contraditórios. Por este motivo, investigações em células isoladas do sistema imune que estão
diretamente envolvidas com o processo inflamatório são relevantes. Objetivos: O presente
estudo teve como objetivo principal investigar o efeito in vitro de três concentrações de
haloperidol e risperidona (20, 30 e 40 μM) na ativação de macrófagos da linhagem RAW
264.7 através da análise de padrões de alteração morfológica celular, níveis de oxido nítrico,
viabilidade 24, 48 e 72 h após a exposição, indução a apoptose e produção de citocinas
inflamatórias e pró-inflamatórias. Métodos: A cultura dos macrófagos foi realizada em meio
RPMI 1640, suplementado com 10% de soro bovino fetal e 1% antibióticos, em estufa de CO2
(5%) a 37o C. Os níveis de oxido nítrico foram determinados por técnica de Griess modificada
que mede a taxa de nitrito/nitrato por espectrofotometria; a viabilidade celular foi determinada
pelo ensaio espectrofotométrico do MTT; a apoptose foi analisada por citometria de fluxo
com marcação celular da anexina V e iodeto de propídio. Análise da expressão do gene antiapoptótico
Bcl-2 e pró-apoptótico BAX foi realizada via QT- PCR bem como a quantificação
das caspases 3 e 8 foi realizada através da técnica de imunoensaio ELISA. Os tratamentos
foram comparados por análise de variância de uma via seguida de teste post hoc de Tukey ou
de Dunnet, através do Software Graph Pad Prism 5.0. Resultados: Macrófagos expostos a
diferentes concentrações de haloperidol e risperidona apresentaram aumento nos níveis de
oxido nítrico, alterações morfológicas e diminuição na viabilidade após 24, 48 e 72 h de
exposição. Os níveis de células em apoptose inicial foram significativamente mais elevados
em células tratadas com haloperidol (40μM) e em todos os tratamentos com risperidona após
24 horas de exposição. A razão Bcl-2/BAX foi menor que 1 em em células tratadas com os
fármacos antipsicóticos indicando indução apoptótica. Os níveis de caspases 3 e 8 também se
elevaram de um modo dose-dependente. Os níveis de citocinas inflamatórias aumentaram em
todos os tratamentos (IL-1β, IL-6,TNFα, INFγ) enquanto os níveis de IL-10, que é uma
citocina anti-inflamatória diminuíram. Conclusão: O conjunto dos resultados sugere que o
haloperidol e risperidona agem diretamente sobre os macrófagos e que podem exacerbar
processos inflamatórios. A ação no metabolismo inflamatório destes fármacos parece
influenciar no desenvolvimento da obesidade de pacientes que usam estes medicamentos por
um longo tempo.
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